银杏叶浸膏（EGB）浸取溶剂与浸取工艺的改进

    目前国内外银杏叶浸膏（EGB）的提取溶剂一般为醇-水溶液（60%～70%）或丙酮-水溶液(50%～60%)。由于丙酮对普通密封圈有腐蚀性，国内不具备生产氟橡胶密封圈的能力，国内厂家均采用水提-乙醇沉淀或乙醇提-水沉的方法。水+乙醇是否是提取黄酮、内酯的最佳溶剂，没有文献或专利证实这一点，也没有比较不同溶剂体系对EGB提取得率和质量的影响报道。本文将对银杏叶浸取溶剂与浸取工艺进行研究与探讨。

1、浸取溶剂的选择与设计

    浸取溶剂体系的选择是影响银杏浸膏质量的重要因素之一，在选择溶剂体系时，应遵循以下几个基本的原则：

(1) 圾效成分有大的溶解度。

(2) 活性分子之间溶解度的比例应该与药品所要求的活性成分之间的比例尽可能接近。

(3) 在自然状态下含量较少的活性成分在所选择的溶剂休系中的溶解度应该大。

    在自然的状态下，银杏黄酮和内酯的存在比是10:1，而EGB国际标准中要求银杏黄酮和内酯的比例是4:1，这就要求我们在各个工艺步骤中要特别注意内酯的提取收率。在目前通常采用的水-醇或水-酮浸取溶剂中银杏黄酮的总溶解度大约为3%，银杏内酯的溶解度在0.01%左右。显然，这种浸取溶剂提取银杏叶中的有效成分的收率很低；有效成分之间的比例也极不协调。

    以3种主要的黄酮甙类（山萘酚类、槲皮素类、异鼠李亭类）、银杏内酯（Ginkgolide A,Ginkgolide B, Ginkgolide C）、白果内酯为物系，选择异辛烷、异丙醇、正已烷、乙醚、乙酸乙酯、乙醇、二氯甲烷、丙酮、丙胺、四氢呋喃、丁酮、乙晴、γ丁内酯、水及其组合体系作溶剂，考察这些有效成分在每种溶剂体系中不同温度下的溶解度，结果表明内酯在溶剂强度为8.50处溶解度最大，但在此溶剂体系中，3种黄酮甙类的溶解度极小。当选择溶剂强度为12.9时的溶剂体系，可以保证3种黄酮甙类有最大的溶解度，但内酯的溶解度又很小而且银杏内酯之间的比例失调。

    通过分析，发现乙醇-水或丙酮-水体系并不能保证黄酮甙和内酯均有较高的溶解度。考虑到实际情况，在确定溶剂体系时，主要以乙醇-水体系为主，在此基础上，再加入10%的辅助溶剂（该溶剂亦是食品、药品生产许可的溶剂），此溶剂有助于提高内酯的溶解度。我们将此新的溶剂体系称为EPW，此体系中浸取的操作温度为80℃～82℃。在新的溶剂体系中，3种黄酮甙和内酯的溶解度都较大，总内酯的溶解度接近10%，总黄酮甙的溶解度接近5%，而且黄酮甙与内酯之间的比例比较协调。在浸取操作过程中，采用7倍溶剂法，单次黄酮浸取收率达80%，内酯的浸取收率达85%。

2、对浸取工艺的研究与改进

    银杏黄酮甙的分子结构中，存在多个酚羟基，酚羟基的性质很不稳定，特别是在温度较高时极易被空气氧化。下面的实验可证实这点：称量1g银杏浸膏置于100ml量筒中，用2ml水润湿后，慢慢加去离子水98ml静置。在第1天内，水的颜色从上至下愈来愈深，这是由于银杏黄酮的溶解和向上扩散所至。到第3天后，溶液的颜色却是从上至下愈来愈浅，这说明溶液饱和后，溶液表面的溶解氧与黄酮发生氧化反应生成醌类致使溶液上部颜色变深。

    为此我们设计了一个定性实验：以苯酚为模拟物系，配制1%浓度的苯酚-水溶液，在72℃下进行氧化反应，45min内，85%的苯酚被氧化。在前面浸取溶剂分析时，我们发现提取温度升高有利于有效成分溶出，但由于银杏黄酮的分子中，一般含有2～3个酚羟基，因此温度升高加剧黄酮被氧化而使之变黑，有专家建议低温提取以提高产品质量的原因在此。为克服上述矛盾，在提取过程中，取82℃作为提取温度，采用氮气保护的方法避免黄酮产生氧化反应。浓缩与沉降过程与目前通用的方法相同。根据上述设想，我们进行了如下试验：

    方案1：采用溶剂①：乙醇（70%）+水（30%）在沸点条件下以7倍量和4倍量溶剂提取100g银杏叶（叶子为河南信阳1996年9月份的大树叶，下同）。

    方案2：采用溶剂②：EPW，在沸点条件下以7倍量和4倍量溶剂提取100g银杏叶。

    方案3：采用溶剂②在沸点条件下以7倍量和4倍量溶剂加氮气保护提取100g银杏叶。

    分别将上述3种方案下获得的两次提取液混合，减压浓缩，蒸干溶剂。

    对3份残渣各加水200ml溶解残渣并在85～90℃时保温至溶液变红，过滤，清除残渣，得3份浓缩液。实验装置示意图见图。实验结果见表。

表  不同实验方案下EGB得率与质量的对比